אילמ"ר - האיגוד הישראלי למדעי המעבדה הרפואית

אילמ"ר - האיגוד הישראלי למדעי המעבדה הרפואית

כינוס שנתי ה-46 | 2012

פוסטרים להצגה בכינוס

פוסטר זה זכה בפרספוסטר מצטיין

POINT MUTATIONS REGARDED AS MISSENSE MUTATIONS CAUSE SPLICING DEFECTS IN THE FACTOR XI GENE

Michal Zucker1, Nurit Rosenberg1, Hava Peretz1, David Green2, Frederik Bauduer3, Ariella Zivelin1 and Uri Seligsohn1
1. Amalia Biron Institute of Thrombosis and Hemostasis, Sheba Medical Center, Tel-Hashomer and Sackler Faculty of Medicine, Tel Aviv University, Israel; 2. Division of Hematology and Oncology, Northwestern University, Feinberg School of Medicine, Chicago, USA; 3. Department of Clinical Hematology, Centre Hospitalier de la Cote Basque, Bayonne, and Laboratory of Human Genetics, Victor Segalen University, Bordeaux, France.

Point mutations within exons are frequently defined as missense mutations. In the factor XI (FXI) gene, three point mutations, C616T in exon 7, G1060A in exon 10 and G1693A in exon 14 were reported as missense mutations (P188S, G336R and E547K, respectively) based on their exonic positions. Expression of the three mutations in baby hamster kidney (BHK) cells in the present study yielded substantially higher FXI antigen levels than FXI levels observed in two affected patients' plasma. Platelet mRNA analysis in one heterozygous patient revealed that the G1693A mutation in exon 14 caused alternative splicing. Platelet FXI mRNA of a second double heterozygous patient for C616T and G1060A mutations in exons 7 and 10, respectively was undetectable suggesting its degradation. In vitro splicing of the mutations in exons 7 and 10 revealed that these mutations, at least in part, impaired normal splicing. For the mutation in exon 7, COS cells transfected with the wild type minigene mainly produced the normally spliced mRNA, while cells harboring the mutated minigene favored production of the alternatively spliced mRNA skipping of exon 7. The mutation in exon 10 caused a significant decrease in the production of the normally spliced mRNA by COS cells transfected with a minigene spanning exons 8-10. In silico analysis revealed that the three mutations are within sequences of exonic splicing enhancers (ESEs) that bind special proteins and are important for correct splicing. Artificial compensatory mutations created near the natural mutations corrected the ESEs' function thereby restoring normal splicing of exons 7 and 10. Our findings define a new mechanism of mutations in the F11 gene and underscore the need to perform expression studies and mRNA analysis of point mutations before designating them as missense mutations.

 

לתכנית הכנס     חזרה לריכוז הפוסטרים 2012
דף הבית | מי אנחנו | רישום לאילמ"ר ולאתר | תקנון | חברי הועד | מערכת האתר | צור קשר | מקצוע המעבדנות הרפואית | מישיבות ועד אילמ"ר | המועצה למעבדות במשה"ב |
חיפוש פרטי חבר | עדכון פרטים | ועדות מקצועיות | מפגשים וועדות המטולוגיה וקרישה | פורום אנדוקריני | פורום האיכות | כנסים שנתיים | ימי עיון | קפה מדע | כנסים של אגודות אחרות | פעילות בינלאומית | אבטחת איכות סקירת ספרות | מכשור ושיטות | דיווחי המעבדות | פרסים | לזכר חברנו | קישורים | דרושים | מידע מקצועי מחברות תומכות    
מומלץ לצפייה ברזולוציה של 768X1024